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--- 毛氈苔無菌播種-2010春 (/tbgweb/cgi-bin/topic.cgi?forum=19&topic=10351)


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/19 11:09pm

新手發文好害羞,以後沒事會上來吵大家,請多多指教唷唷唷>///<


因為拿到了蝕友的種子,打算組培出來後分享,因此開了這個主題,希望有經驗的朋友指點一二,做得不好請不用客氣指出來,這樣才有成長的空間^^


以下開始日記式的文章(我也只會寫這種文 囧")


--------------------------------------------------------------------------

最近要弄毛種子的無菌播種,我們實驗室有3年以上沒有人弄組培了吧,東西缺超大ˊˋ...

前幾天特別去徵得老師同意,開始一樣一樣湊齊材料,要來弄組培囉!

不過剛開始就大受打擊...

為甚麼我們系上的MS培養基要自己配啊啊啊啊~~~~~~!!

我一直以為這邊也有一整罐配好的MS粉,加個水煮一煮就是健康好吃的MS培養基

結果

要自己把所有化合物加在一起,變成一鍋(?)培養基啊啊啊啊~~~~!!

MS是很麻煩的培養基耶...,[url=http://www.labflytrap.com/in-vitro-aj.html ]http://www.labflytrap.com/in-vitro-aj.html [/url]往下拉可以看到M&S medium的配方,不只如此,這些化合物不能全部放同一個容器,必須考慮彼此之間的化學反應...,為了避免沉澱,母液會分成很多罐冰,要用時再合體。以今天去問花卉組來說,他們那邊的母液是先配成很多瓶,再合併成6瓶,然後要用的時候從這6瓶各取一定量配成1L的培養基...

好懷念以前大學那一小小罐白色的MS粉末,早知道就A一些來冰啦...Q口Q|||


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/19 11:10pm

[b]培養基配置[/b]

結果是跟隔壁助理學長要到1L的量\(@▽@)/|||

這邊是用四罐配成一罐,每罐取10X或100X

因為毛種子用1/2 MS即可,所以配1公升其實就是2公升,超開心的啦><

[color=#0000FF]配方:1/2 MS + 3% sucrose+1% agar
PH:5.5~5.8[/color]


↓MS培養基母液、60g的蔗糖
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100323_%282%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100323_%281%29.JPG[/img]

↓培養基分裝、加入1% agar(右圖瓶底有粉末...)
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100323_%283%29.JPG[/img]   [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100323_%284%29.JPG[/img]

↓用鋁箔紙封口(哭),拿去滅菌
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100323_%286%29.JPG[/img]

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100323_%287%29.JPG[/img]


↓滅完菌的瓶子們放著,還有圖中的鋁箔紙很失敗,後來發現不用這麼大片,太大片反而封不緊,後來播種完改成小片的封口,果然又穩又密~!(看得出我是新手...)
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100324_%282%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100324_%281%29.JPG[/img]


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/19 11:12pm

[這篇文章最後由biosaa在 2010/04/19 11:20pm 第 1 次編輯]

[color=#FFD700][b]2010.03.27 消毒+無菌播種[/b]

[b]種  類:[/b]亞熱帶毛氈苔
[b]消  毒:[/b]6%漂白水消毒10分鐘
[b]特殊處理:[/b]無[/color]

本來想採用YAB同鞋提供的滴管消毒法,結果我們兩間實驗室竟然都找不到玻璃滴管,只好採用濾紙過濾的方式來消毒ˊˋ"

先放在微離心管中加漂白水搖晃10分鐘,然後倒到滅過菌的濾紙上,用滅菌水清洗,再用pipette吸取滴入瓶內。

↓濾紙和漏斗放在一起,用鋁箔紙封住拿去滅菌
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100327_%281%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100327_%282%29.JPG[/img]

↓眾器材一覽
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100327_%288%29.JPG[/img]

↓拿去滅菌的器材們,如tips、水、大鑷子、擦手紙、改成較小塊的封口用鋁箔紙等。其中大鑷子以鋁箔紙包覆、擦手紙和鋁箔紙放入燒杯後也用鋁箔紙封住燒杯口滅菌。
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100327_%289%29.JPG[/img]

↓這部分不能滅菌,只能以酒精噴過放入無菌操作台
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100327_%2811%29.JPG[/img]

↓無菌操作台。第一次使用沒有玻璃門的操作台,風向是水平的唷!
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100328_%281%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100328_%282%29.JPG[/img]


(操作過程很難拍...,大概就是跟開頭敘述的差不多!)


↓完成,注意封口改成小片的鋁箔紙囉!真的比較緊密,不會轉動下方也不會露出空隙!
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100328_%283%29.JPG[/img]

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100328_%285%29.JPG[/img]


---------------------------------------------------------------------------------

[b]後記:[/b]

1.瓶子打開鋁箔紙前都會先用火燒過封口處,傾斜晃動的過程中有些培養基就崩掉了,變成到處滑的果凍...............................

2.[color=#BF0000][b]操作時一定要記得關上紫外線燈[/b][/color],我在過程中有幾次忘記關,回家也沒有甚麼異狀,結果晚上睡覺的時候眼睛竟然痛醒,一整晚都睡不好,臉部也有刺痛感。後來想想紫外燈開著其實就像是直視太陽在操作,對身體的傷害很大啊...!!到今天起床眼睛還是很乾澀不適,偏偏眼科都沒有開,大家一定要注意實驗安全啊ˊˋ


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/19 11:12pm

播種過了幾天後我就後悔用漏斗過濾了...

[b]2010.04.04[/b]

漏斗過濾完得用鑷子把種子從濾紙上抹/沖/撥進瓶子裡,我又是第一次用,過程中很容易出狀況

所謂的狀況就是發霉.........

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100404_%282%29.JPG[/img]


怎麼辦咧~?

種子那麼貴不能丟,只好全部倒出重來啊...

先用水把裡面的東西沖出來,本來希望只有種子被沖出,結果水一下去,整個培養基就變成寒天茶,只好種子+培養基全部倒出來

倒出來也沒辦法用濾紙或者紗布分離,因為種子實在太小啦!只能用pipeet慢慢吸,把果凍吸掉留下種子,從250ml燒杯濃縮到一個微離心管,花了快要30分鐘...

裝進微離心管後,加入6%漂白水,再從頭消毒→洗清→播種

這次總算沒有發霉了ˊˋ|||

以後不用濾紙了啦!還是照大學時代消毒清洗都在微離心管最方便,種子洗完直接吸進tip然後噴進瓶子就好了,原來這才是最方便的方法!!

如果有其它的消毒秘方請一定要告訴我唷!YAB兄的方法因為沒有玻璃滴管所以沒試過,也是有點可惜@@a


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/19 11:13pm

[這篇文章最後由biosaa在 2010/04/19 11:21pm 第 1 次編輯]

[b]2010.04.05[/b]

[color=#FFD700][b]種  類:[/b]這一批有三款不會休眠的長柄毛,種子也不需要冷積層處理唷!
[b]消  毒:[/b]6%漂白水消毒10分鐘
[b]特殊處理:[/b]無[/color]

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100409_%282%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100409_%281%29.JPG[/img]


[b]2010.04.09[/b]

03.27播的D. admirabilis發芽了!才過了13天唷!

當初用鑷子播種子效果很差,一堆種子被鑷子塞進培養基裡面,變成下圖的窘境,我也愛莫能助啊...ˊˋ

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100409_D_admirabilis.JPG[/img]


這是D. coccicaulis,埋得更深(哭)
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100409_D_coccicaulis.JPG[/img]


不好意思洗了好多篇 囧|||


-- 作者: gotohsu
-- 發表時間: 2010/04/19 11:27pm

加油了~
剩下的就等您的消息了~


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/19 11:31pm

saa會害羞?
少來了~   ˋ( ° ▽° ) ノ

就我的經驗, 用濾紙搭配玻璃滴管超快速.
用pipette來播是不正確的, 因為pipette很難滅菌.
另外, 用那麼大瓶來播種也不對,
因為瓶子越大越易污染,
種子播得越多越易污染.
我以前播種是用直徑約2.5到3cm的平底玻璃管來播的.
每管只播10粒而已.
做得好的話污染率降到10%以下.
也就是說做10管大概只有1管污染.


-- 作者: cool7114
-- 發表時間: 2010/04/19 11:31pm

每次看到組陪就覺得很神奇.....

不知道器官能不能組陪........


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/19 11:34pm

妳配培養基有個重大的錯誤, 所以導致果凍不均勻...


-- 作者: tata0421
-- 發表時間: 2010/04/19 11:38pm

[這篇文章最後由tata0421在 2010/04/19 11:55pm 第 1 次編輯]

扁平蓮座的可以用petri dish
很方便


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/19 11:40pm

[這篇文章最後由biosaa在 2010/04/19 11:43pm 第 1 次編輯]

我是新人當然會害羞囉=3=

教主別賣關子了快告訴我啊!!是agar沒有搖勻嗎?

請順便教一下濾紙搭配玻璃滴管怎麼用,教主大好帥QQ

不過話說我用pipette播之後都沒有汙染唷~,成功率百分百!可見我有使用pipette的才~!至於瓶子是不小心的啦,後來想到已經太遲了,超小的種子和大到爆炸的瓶,我也很囧||||

巨爪兄,植體也可以,我就是打算等種子長成之後直接切來組培,這樣就不用消毒了=ˇ=


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/19 11:48pm

叫我爺爺就教妳!
(°ω°)+


-- 作者: 吉娃娃
-- 發表時間: 2010/04/19 11:54pm

人客啦~快來看 有美女要找爺爺了


-- 作者: 愛花ㄉ青蛙
-- 發表時間: 2010/04/20 00:00am

[這篇文章最後由愛花ㄉ青蛙在 2010/04/20 00:05am 第 3 次編輯]

果凍調好洋菜溶解好之後 要邊喇邊倒進瓶子裡
果凍粉 水晶果凍粉五百西西加一克就可以了
五百西西的果凍可以分裝六到七瓶左右的瓶子
果凍高度有一公分以上

鋁鉑紙 使用鋁鉑紙捲寬度分成三或四份的大小就可以了 大概五公分吧

濾紙滅菌
把濾紙丟進瓶子裡 比照果凍滅菌方法

無菌水套種子就可以播的算均勻了
不然就是找根棉花棒之類的 黏附種子 然後徒在果凍上面

種子滅菌可以用濾紙包起來 全部丟到滅菌的溶液裡

果動太薄 在斜晃瓶子的時候會造成果凍脫離


-- 作者: 張喏
-- 發表時間: 2010/04/20 00:04am

SAA
現在隔壁幾乎>


CP LOVE的未來
和您我的心血
找天周末
再討論八
我有想過要在塔內做
可是
這裡有固定的運作
可能有困難


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/20 00:08am

這個...張喏你們想要搞什麼嗎?
別把塔內給砸了啊~   Σ( ° △ °|||)


-- 作者: vn513165
-- 發表時間: 2010/04/20 00:08am

[quote][b]下面引用由[u]biosaa[/u]在 [i]2010/04/19 11:09pm[/i] 發表的內容:[/b]
操作時一定要記得關上紫外線燈,我在過程中有幾次忘記關,回家也沒有甚麼異狀,結果晚上睡覺的時候眼睛竟然痛醒,一整晚都睡不好,臉部也有刺痛感。後來想想紫外燈開著其實就像是直視太陽在操作,對身體的傷害很大啊...!!到今天起床眼睛還是很乾澀不適,偏偏眼科都沒有開,大家一定要注意實驗安全啊ˊˋ


光這幾瓶你弄了多久?我記得22-23年前我不過10分鐘左右沒關燈....就痛得我半夜去敲醫生的門......還蒸眼睛....(現在回想起來都還會怕怕的)


-- 作者: 張喏
-- 發表時間: 2010/04/20 00:29am

[quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2010/04/20 00:08am[/i] 發表的內容:[/b]
這個...張喏你們想要搞什麼嗎?
別把塔內給砸了啊~   Σ( ° △ °|||)
[/quote]
大大想太多只是個活動
但現在
隔壁有些人主動跟被動離開了
所以這樣我會很難實施
不過不會在這
這裡人口量太大了


-- 作者: yab7829
-- 發表時間: 2010/04/20 00:34am

[這篇文章最後由yab7829在 2010/04/20 00:50am 第 3 次編輯]

SAA學姐XD

母液不能直接加上洋菜就這樣沒事的丟進去瓶子內高壓滅菌...

拿出神奇的攪拌機,用1-3L的容器先裝一半以上的純水,放入糖、活性碳(效果不錯)接著將水定位並測量pH (要先測完在加洋菜)(食蟲我之前用大約5)之後 才加入洋菜並攪拌均勻,但到這還沒結束...還要分三次左右微波共十二分鐘(教主指的因該就是這了!也可用隔水加熱方式) ,再分裝到瓶子(一瓶約100cc) 最後再進高壓滅菌釜就大功造成!!!

希望這簡略的流程對妳有幫助拉...


補充 紫外燈

當開紫外燈的時候關日光燈,要開日光燈就關紫外燈
養好這習慣,就可以快樂又安全的玩實驗拉!!!


-- 作者: yab7829
-- 發表時間: 2010/04/20 00:43am

[quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2010/04/19 11:31pm[/i] 發表的內容:[/b]
saa會害羞?
少來了~   ˋ( ° ▽° ) ノ
就我的經驗, 用濾紙搭配玻璃滴管超快速.
用pipette來播是不正確的, 因為pipette很難滅菌.
...
[/quote]


+1 玻璃管效果好又快速XD


-- 作者: 愛花ㄉ青蛙
-- 發表時間: 2010/04/20 01:43am

前吹式的好像只有紫外燈而已


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/20 08:26am

那種無菌操作台的紫外光燈的開關問題,
就反應出台灣廠商的不用心...
有一種開關可以有三個切換, 開UV, OFF, 開日光燈.
無論是開日光燈或UV, 一次只能開一種燈,
這樣就不會發生誤開UV的問題.
國外的無菌操作台更誇張,
你若開UV, 你完全不能使用操作台,
必須關了UV才可開啟操作台.


-- 作者: cfc
-- 發表時間: 2010/04/20 09:47am

為什麼毛氈苔播種要無菌培養,用一般的介質就發芽得很好了~~
用無菌培養,屆時出瓶還得馴化,多麻煩~~
但是作稀有物種的生長點組培,倒是值得一試....


-- 作者: 愛花ㄉ青蛙
-- 發表時間: 2010/04/20 11:17am

操量組織培養最快
而且可以提高採收已久的種子發芽率


-- 作者: kela
-- 發表時間: 2010/04/21 09:47pm

[quote][b]下面引用由[u]biosaa[/u]在 [i]2010/04/19 11:13pm[/i] 發表的內容:[/b]
2010.04.05
種  類:這一批有三款不會休眠的長柄毛,種子也不需要冷積層處理唷!消  毒:6%漂白水消毒10分鐘特殊處理:無
(saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_ ...
[/quote]
6趴的漂白水是指6趴有效氯的次氯酸鈉液嗎? :em14:....
一般工業用漂白水約10-12趴
6趴真的是蠻強的 :em11: ....

以前在食品廠進入充填室前
有一個淺水池讓進入者消毒鞋底
記得好像才不低於200 PPM而已
6趴消毒種子真的有點被嚇到~~

感謝大大分享心得~~增廣見聞哩~~ :em18:  :em25:  :em25:  :em25:    


-- 作者: kurt
-- 發表時間: 2010/04/22 02:04pm

濃度6%<12%
工業用應該再稀釋成為6%
記得酒精95%成為70%要加水稀釋才對
不過對組培的東東沒概念~不知道對不對呢?


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/24 08:57pm

整理大家的建議,簡單分為下面兩個:

agar分三次左右微波共十二分鐘,也可用隔水加熱方式就不用分批加入,再分裝到瓶子進高壓滅菌釜,出來的果凍比較Q,不會這麼容易碎

蘭花瓶太大,可以用試管就行了!種子分多瓶播種,分散汙染的風險

↓這個應該是教主說的試管
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/TC_others/normal_PICT0008.JPG[/img]

↓有加活性碳的樣子
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/TC_others/normal_PICT0009.JPG[/img]

↓小錐形瓶也很可愛
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/TC_others/normal_PICT0010.JPG[/img]


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/24 09:02pm

[quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2010/04/19 11:48pm[/i] 發表的內容:[/b]
叫我爺爺就教妳!
(°ω°)+
[/quote]

教主大...您得先找到小蘿莉教母才有機會變爺爺...

[quote][b]下面引用由[u]張喏[/u]在 [i]2010/04/20 00:04am[/i] 發表的內容:[/b]
SAA
現在隔壁幾乎>
CP LOVE的未來
和您我的心血
...
[/quote]
看看花壇或者綺麗囉
不過得先跟當地板主支會過唷!


[quote][b]下面引用由[u]cfc[/u]在 [i]2010/04/20 09:47am[/i] 發表的內容:[/b]
為什麼毛氈苔播種要無菌培養,用一般的介質就發芽得很好了~~
用無菌培養,屆時出瓶還得馴化,多麻煩~~
但是作稀有物種的生長點組培,倒是值得一試....
[/quote]
比較難繁殖的如球毛、北嶺,用組培的方式可以取得大量植株
不過我發現亞熱帶毛一下就發芽,好像又可以自花授粉...
拿來組培真是滿浪費的...囧"

[quote][b]下面引用由[u]kela[/u]在 [i]2010/04/21 09:47pm[/i] 發表的內容:[/b]
6趴的漂白水是指6趴有效氯的次氯酸鈉液嗎? ....
一般工業用漂白水約10-12趴
6趴真的是蠻強的  ....
以前在食品廠進入充填室前
...
[/quote]
[quote][b]下面引用由[u]kurt[/u]在 [i]2010/04/22 02:04pm[/i] 發表的內容:[/b]
濃度6%<12%
工業用應該再稀釋成為6%
記得酒精95%成為70%要加水稀釋才對
不過對組培的東東沒概念~不知道對不對呢?
[/quote]

一般網路上建議10%唷!可見真的滿濃的!
因為實驗室只有一罐一般外面賣的漂白水清潔劑(6%)
所以直接拿來用,當時還擔心消毒不乾淨說@@


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/25 10:46am

[quote][b]下面引用由[u]biosaa[/u]在 [i]2010/04/24 09:02pm[/i] 發表的內容:[/b]
教主大...您得先找到小蘿莉教母才有機會變爺爺...
[/quote]
saa真是不機靈...( = 3 = )
儒子不可教也....囧|||
我可以收個"乾孫", 不需要等30年.

另外, 教祖的太太不是叫作"教母", 應該叫什麼我也不知道.
教母是指"女性"的宗教領導者, 男性的稱作教祖.


-- 作者: tata0421
-- 發表時間: 2010/04/25 10:59am

[這篇文章最後由tata0421在 2010/12/14 10:52am 第 1 次編輯]


直接在操作台只用滅菌的tip及pipet洗
沒用到滴管及濾紙


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/26 08:38pm

pipette的問題是它比較不易徹底滅菌,
而且能滅菌的廠牌不多.
所以如果沒有要精密定量液體的體積,
使用玻璃滴管較好.
如果更講究,
玻璃滴管可在操作前再用火烤一下.
Pipette的缺點是不能火烤.


-- 作者: b968891
-- 發表時間: 2010/04/27 09:32pm

[quote][b]下面引用由[u]tata0421[/u]在 [i]2010/04/25 10:59am[/i] 發表的內容:[/b]
我都很懶
直接在操作台只用滅菌的tip及pipet洗
只用了兩個小離心管及燒杯接廢液
沒用到滴管及濾紙
[/quote]

我也是耶~哈哈

我覺得方便就好啦

只要能成功 什麼都是好方法


-- 作者: tata0421
-- 發表時間: 2010/04/27 11:24pm

[這篇文章最後由tata0421在 2010/12/14 10:53am 第 1 次編輯]

[quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2010/04/26 08:38pm[/i] 發表的內容:[/b]
pipette的問題是它比較不易徹底滅菌,
而且能滅菌的廠牌不多.
所以如果沒有要精密定量液體的體積,
使用玻璃滴管較好.
...
[/quote]
我們lab的pipette都是表片噴一下酒精就進去操作台
tip滅菌後放到烘箱烘乾後丟到操作台使用
反正目前發霉率還蠻低.一般阿拉伯芥用玻璃滴管點


-- 作者: kela
-- 發表時間: 2010/04/28 02:49am

[quote][b]下面引用由[u]biosaa[/u]在 [i]2010/04/24 09:02pm[/i] 發表的內容:[/b]
一般網路上建議10%唷!可見真的滿濃的!
因為實驗室只有一罐一般外面賣的漂白水清潔劑(6%)
所以直接拿來用,當時還擔心消毒不乾淨說@@
[/quote]
10趴~~不怕黑芝麻進  變白芝麻出~ :em01:  :em01: ...
不太懂種子消毒為何要用漂白水
臭臭的  滑滑的很難洗  而且是強鹼性

還有消毒力比漂白水更強的更優的
比方說二氧化氯  雙氧水
可以縮短操作時間  又比較乾淨
或許可以一試說 :em15: ...
 


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/28 08:19am

其實變成白芝麻還是可以發芽~

其他的消毒劑不是不可用, 只是要測試才知道行不行.
一般漂白水是因為過去使用多年也沒人說它很不好,
所以現在還是最常用的消毒劑.

用到10%的漂白水可能太濃吧?
那個網路資訊對嗎?
以前我們的經驗是市售漂白水要稀釋10倍才能用,
消毒10分鐘.
種子若較髒或有皺摺, 就配合超音波振盪.


-- 作者: cjh8407
-- 發表時間: 2010/04/28 12:44pm

好专业。。。厉害啊


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/04/28 05:38pm

[quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2010/04/28 08:19am[/i] 發表的內容:[/b]
用到10%的漂白水可能太濃吧?
那個網路資訊對嗎?
以前我們的經驗是市售漂白水要稀釋10倍才能用,
消毒10分鐘.
...
[/quote]
漂白水濃度來自三個食蟲組培網站的資料
我想說三人成虎應該錯不了XD
網站內容我翻譯過了,不曉得可不可以直接附上我翻譯過的網址
http://saaxd.no-ip.info/saaBlog/viewtopic.php?p=1817#p1817


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/04/28 06:57pm

或許種子的皮很厚, 所以用那麼濃的漂白水也沒問題.
其實種子滅菌都不是問題,
問題最大的是拿植物的一部份組織來作培殖體,
要怎麼消毒一直都是很大的問題.
以前有聽說"氯化汞"很好用,
不過想到它的廢棄物要處理可能要申報,
還是別用的好...


-- 作者: kela
-- 發表時間: 2010/05/07 12:47pm

[quote][b]下面引用由[u]biosaa[/u]在 [i]2010/04/28 05:38pm[/i] 發表的內容:[/b]
漂白水濃度來自三個食蟲組培網站的資料
我想說三人成虎應該錯不了XD
網站內容我翻譯過了,不曉得可不可以直接附上我翻譯過的網址
http://saaxd.no-ip.info/saaBlog/viewtopic.php?p=1817#p1817
[/quote]
(真的不是來吐槽的~~ :em01: 請忍耐 :em15: )....
像在工程實務界  以實用應用為主
通常都不是很嚴謹去做界定(也許第一次嚴謹)
比方說 水中某某成分以  mg/L為單位
為了方便內部傳遞或應用  就直接以PPM稱呼
可以這樣做的原因  是因為在稀薄溶液下1L相當於1000g
不過大大若是要進行研究 或提供參考討論(學院派)
在下就比較建議要嚴謹比較好
而且每個操作步驟  最好能探求 為什麼  要如此  才好

10%的漂白水可以有很多種解釋
1.10%有效氯的次氯酸鈉溶液
2.10%(重量百分率)的次氯酸鈉溶液......(也許放了1年)
3.拿市售的漂白水稀釋10倍 變成10%
  而市售的漂白水也分粉多種  含氯(次氯酸鈉.二氧化氯..)  不含氯(雙氧水...)

例以前拿到一份SOP  某樣材料寫  硫酸液(1+3)
就搞得一群人頭大  不曉得到底意思是
硫酸1份+水3份  還是水1份+硫酸3份  還是硫酸1份稀釋到3份 :em01:


浸泡2% 1-50 PPM 4小時
先加入2% PPM
就怪的很   搞不懂 :em14:  :em14:  :em14: ...

1.快速浸泡91%酒精
這在下也有疑問
酒精滅菌效果最優應該是約75%(容積百分率濃度....忘了是不是以Vt%表示)
91%可能導致使細菌暫時失去活性
因為高濃度酒精形成的變性蛋白質層(在細菌胞內)
會妨礙再次使用殺菌藥物的效果
這邊也是令人費解 :em14: .....

亂7.8糟打了一堆  要發表啥意思  在下也搞暈了
反正就是單位的使用   真的很重要啦 :em15: ....


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/08/21 08:29pm

[color=#0000FF][b]2010.08.18[/b][/color]

從日本回來,還狠狠地睡了一覺才去探望瓶苗們!隔了13天大家都變大了說@ˇ@

首先還是我只要溫度低一點絕對像雜草般的[b]D. admirabilis[/b]
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_admirabilis_%283%29.JPG[/img]

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_admirabilis_%284%29.JPG[/img]


也不錯雜草的D. coccicaulis,可是實在太怕熱的讓我好傷心(放在25度C的環境OK)
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_coccicaulis_%283%29.JPG[/img]

[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_coccicaulis_%284%29.JPG[/img]

[b]D. intermedia "Big Audrey"[/b]-新生代雜草代表,而且據喏兄說可以度夏,只是長得稍微不好而已,組培超容易,很適合推廣!
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_intermedia_Big_Audrey_%283%29.JPG[/img]

[b]D. affinis[/b]
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_affinis_%283%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_affinis_%284%29.JPG[/img]


不知道是不是錯覺(看不清楚),[b]曼西(D. menziesii)[/b]好像一分為二了耶@@
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_menziesii_%281%29.JPG[/img]

[b]D. peltata[/b]還是沒有變成直立,目前懷疑是培養基太淺了,對於球根的形成有很大的阻礙,也可能因此影響地上部形態,所以都改成深培養基了~~!
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_peltata_noGA.JPG[/img]

[b]不知名的北嶺毛[/b]越長越大,末端越沒有捕蟲構造,可能是培養基太營養的關係吧,不過這不重要,我想長大移出來就會好了:/

話說回來,它基部的小苗好像越來越多了耶= ="
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_petiolaris_complex__unknown_%281%29.JPG[/img] [img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_petiolaris_complex__unknown_%282%29.JPG[/img]

[b]新成員D. sp. floating[/b]
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_20100813_D_sp_floating.JPG[/img]


-----------------------

裝在雞精瓶的越來越大

[b]D. coccicaulis[/b] 基部長了好多小苗,這類型通常用葉片組培都可以弄出一堆苗~!
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_D_coccicaulis_%282%29.JPG[/img]

相較之下[b]D. admirabilis[/b] 的基部沒有小苗,可見這一款要葉插也不容易!
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_D_admirabilis_%282%29.JPG[/img]

這瓶的[b]D. coccicaulis[/b] 右邊很明顯出現了一位不明人士...這誰啊(翻桌)!之前出瓶顯示右邊這種耐熱性明顯較D. coccicaulis高(雖然最後也熱死了),有點像好望角但是應該不是...
[img]http://saaxd.no-ip.info/cpg/albums/plants_Drosera_TC/Drosera_TC_2010/normal_Drosera_TC_D_coccicaulis_%283%29.JPG[/img]


-- 作者: Choir
-- 發表時間: 2010/08/21 10:15pm

第二張看起來怪恐怖的
好像寄生蟲之類的生物 (((( ;゚Д゚))))


-- 作者: csyin
-- 發表時間: 2010/08/21 10:16pm

瓶苗出現不明人士...囧
怎麼會這樣呢?


-- 作者: ARC諺
-- 發表時間: 2010/08/21 11:13pm

請瓶子下面白白的是什麼是培養基嘛???
是的話我也想要一些來栽培看看!!!
不知道你的播種下去之後幾天後就發芽了???
是培養基放在瓶中在把瓶口用鋁箔紙封起來就可以了嘛??
還使要做些什麼事


-- 作者: 阿行
-- 發表時間: 2010/08/21 11:46pm

我的天... 難道你對栽培真菌有興趣... 冏


-- 作者: ARC諺
-- 發表時間: 2010/08/22 04:33pm

沒有啦!!^^


-- 作者: ARC諺
-- 發表時間: 2010/08/22 05:23pm

那瓶底白色的培養基哪裡有賣!!!!
有點興趣


-- 作者: 張喏
-- 發表時間: 2010/08/22 08:39pm

[quote][b]下面引用由[u]ARC諺[/u]在 [i]2010/08/21 11:13pm[/i] 發表的內容:[/b]
請瓶子下面白白的是什麼是培養基嘛???
是的話我也想要一些來栽培看看!!!
不知道你的播種下去之後幾天後就發芽了???
是培養基放在瓶中在把瓶口用鋁箔紙封起來就可以了嘛??
...
[/quote]
OVO
這個阿

植物組織培養
要成功
還是要到大學實驗室
自己買設備的話
我想會有點不合大大""有點興趣""的需求
之前有人想搞家庭是組培
不過我自己是沒看到"下文"


-- 作者: ARC諺
-- 發表時間: 2010/08/22 08:58pm

沒關係!!   我是有興趣啦!!!!
我想用來葉插小捕我有成功啦!!!可是我是等了快一個月才冒出三株小小豬了小捕!!
我想說要拿來葉插會比較快一點啦= =


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/08/25 09:33am

[quote][b]下面引用由[u]Choir[/u]在 [i]2010/08/21 10:15pm[/i] 發表的內容:[/b]
第二張看起來怪恐怖的
好像寄生蟲之類的生物 (((( ;゚Д゚))))
[/quote]
培養基太淺根太肥的結果@@"

[quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2010/08/21 10:16pm[/i] 發表的內容:[/b]
瓶苗出現不明人士...囧
怎麼會這樣呢?
[/quote]
挑我語病=皿=...不明毛啦!

[quote][b]下面引用由[u]ARC諺[/u]在 [i]2010/08/21 11:13pm[/i] 發表的內容:[/b]
請瓶子下面白白的是什麼是培養基嘛???
是的話我也想要一些來栽培看看!!!
不知道你的播種下去之後幾天後就發芽了???
是培養基放在瓶中在把瓶口用鋁箔紙封起來就可以了嘛??
...
[/quote]
第一頁有介紹相關資訊,請先看過,日期也有紀錄可以推知發芽天數。培養基不是封起來就可以的,所以我們一直都有在討論滅菌,同樣在第一頁有簡單的敘述。


-- 作者: biosaa
-- 發表時間: 2010/08/25 09:46am

[這篇文章最後由biosaa在 2010/08/25 09:48am 第 1 次編輯]

[quote][b]下面引用由[u]張喏[/u]在 [i]2010/08/22 08:39pm[/i] 發表的內容:[/b]
自己買設備的話
我想會有點不合大大""有點興趣""的需求
之前有人想搞家庭是組培
不過我自己是沒看到"下文"
[/quote]

下文有唷!只是隱藏在某個角落= ="
http://saaxd.no-ip.info/saaBlog/viewtopic.php?p=2020#p2020

(倒數第三樓...為什麼連結會亂跑= =)


-- 作者: 張喏
-- 發表時間: 2010/08/25 05:39pm

[這篇文章最後由張喏在 2010/08/25 05:39pm 第 1 次編輯]

= =

我還以為無疾而終


-- 作者: DODY
-- 發表時間: 2010/08/26 00:37am

"精彩"


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